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Elisa实验中为什么会产生假阳性?

发布时间: 2022-07-27  点击次数: 213次
   在Elisa实验中,很多新手不知道一开始怎么上手操作,操作人员经常会遇到自己的检测数据和相关文献中的实验结果差别较大,甚至相反,或与预期不一致的情况,也常常为此感到困惑。
  其实很多时候都是由于在操作的时候,细节问题没注意好,所以才会导致Elisa假阳性的出现,在Elisa实验中,假阳性产生的原因分析有这几点:加样,洗涤,温育和酶标仪的读取,这也是Elisa实验中比较关键的几点,加样时应将所加物加在BLISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。有些实验室有全自动酶免加样系统,可较好地避免误差。
  再一个就是洗涤,无论是手工操作还是机器操作,得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关,Elisa就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。温育也是同等重要,温育一般用湿盒或水浴,反应板不宜叠放,以保证各板温度都能迅速平衡,为避免蒸发,板上应加盖。
       最后就是酶标仪读数,首先酶标仪应定期进行保养,对滤光片要定期校正;其次酶标仪波长设置要正确,使用双波长,一个检测波长,一个参比波长,以消除微孔板底部划痕、不平、指印或液面高度差异造成的光干扰。
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