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流式抗体有哪些特性?如何使用保存

发布时间: 2022-10-20  点击次数: 21次
  荧光抗体的选择是多色流式设计的关键步骤。流式抗体选择的优劣,取决于所选的标记物和偶联的荧光染料以及它们与流式细胞仪光学配置的兼容性。
 
  抗体的特性:
 
  1、靶标特异性:确定标记物名称,确定是细胞表面表达,还是细胞内表达。细胞内表达需要进行透膜。
 
  2、物种来源:确定待测样本的种属来源。例如,抗小鼠的抗体,不能用于人的样本的检测。
 
  3、实验类型:大多数只标明用于WB、IP、IHC、IF、ChIP的抗体都不适用于流式实验。选择标明用于FC实验的抗体,并有有引用文献和实验数据图。
 
  4、克隆号:有一些标记物有多个克隆号,选择文献报道中使用多,荧光标记种类多的克隆号。
 
  5、厂家和批号:不同厂家或同一厂家生产的不同批号的相同荧光的相同标记物的抗体,荧光染料的强度可能有少许差别,不建议一次实验混合使用。
 
  流式抗体的使用与保存:
 
  1、抗体稀释
 
  适当的抗体使用浓度,才能真实的反应各种细胞的比例。抗体不足,可能出现假阴性结果;抗体过量,可能出现假阳性结果。可以通过检测抗体滴度,获得使用稀释度。通常使用稀释度会低于供应商建议的稀释度,这样不仅可以获得可靠的染色结果,还能将花费降小。
 
  2、抗体保存
 
  直标的流式抗体一般需要4℃避光保存,不要冻存。冷冻可能会导致荧光抗体沉淀和聚集,影响抗体的效价。

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