良好的制片是所有病理实验的基础,这对于骨组织而言更为重要。骨组织制片,脱钙是非常关键的组织处理步骤,能不能制出好的含骨切片以及后期染色如何,主要取决于
ElabscienceEDTA脱钙液的选择和脱钙的质量。
一般来说,只要组织中含有骨、软骨等都需要脱钙后才能制片。例如,研究吸入性药物时,鼻腔是需要重点关注的组织结构;研究骨折愈合、骨组织肿瘤时,脱钙必不可少;研究血液肿瘤时常需观察动物胸骨骨髓红系、粒系和巨核系,脱钙还是少不了。
ElabscienceEDTA脱钙液配制30%盐酸溶液1000ml(10%中性福尔马林液700ml+浓盐酸300ml)加入140g氯化钠,待其完全溶解后再加入20ml冰醋酸。在日常病理技术工作中,有多种对骨骼的脱钙方法和脱钙组织切片的制作方法。
本文所述脱钙方法和脱钙液从脱钙速度,对组织的损伤程度以及切片染色等方面效果都比较理想,ElabscienceEDTA脱钙液与其他酸类脱钙液相比较,对组织损伤小,脱钙时间短,并作用温和,其中30%的盐酸溶液对脱钙组织造成的损害较小,对组织不膨胀,不至于导致脱钙过程缓慢,但核染色不佳。
加入氯化钠可以防止脱钙组织因经过盐酸脱钙后导致的切片染色偏红,加入冰醋酸可使脱钙组织软化,有利于切片,从而使制片效果更加理想。对照组以单纯30%盐酸为主的ElabscienceEDTA脱钙液与新方法脱钙液对同等体积、大小、部位相同的骨组织同时进行脱钙,前者制作的骨骼切片不平整,染色偏红,胞核红染,核质不清晰,切片整体组织结构显示不清。
经新方法脱钙后所制作的切片组织结构显示清晰,切片中的软组织和骨组织结构均可完整显示,细胞染色清晰,核质对比鲜明,制片中所用的固定剂、脱水剂、透明剂等都为日常技术工作试剂,而且制作出的切片效果很好。
在本方法中所用的固定、脱水、透明、浸蜡、染色试剂都可以数次重复使用,试剂配制和操作方法简单,值得临床推广应用。